Namun, perbedaan pendapat mengenai administrasi provinsi dengan cepat memicu konflik antara mantan sekutu. Pada tanggal 9 Juni 1866, Prusia menduduki Holstein, yang dikelola oleh Austria. Sementara itu, meminta Diet Wina untuk mobilisasi umum negara-negara Jerman melawan Prusia, yang berlangsung pada tanggal 14 Juni. Menimbang mobilisasi itu ilegal, Prusia menyatakan pembubaran Konfederasi Jerman dan menduduki Saxony, Hanover dan Hassel-Kassel, yang dimulai oleh pangeran Austro-Prussian yang disebut Prussian. Meskipun kedua negara itu menduduki sebagian dari Kadipaten, perbedaan pendapat mengenai administrasi provinsi dengan cepat memicu konflik antara mantan sekutu. Namun, pada tanggal 23 Agustus 1866, Prusia menduduki Holstein, yang dikelola oleh Austria. Sementara itu, meminta Diet Wina untuk mobilisasi umum negara-negara Jerman melawan Prusia, yang berlangsung pada tanggal 14 Juni.
Tahun 1866