Lebih dikenal dengan julukan "Picchio", selama karir klubnya, De Sisti bermain untuk klub kampung halamannya AS Roma pada dua kesempatan (1960<unk>65, 1974<unk>79), dan ACF Fiorentina (1965<unk>74), memenangkan beberapa gelar domestik dan internasional dengan kedua klub. Dia membuat debut di Serie A dengan Roma dalam kekalahan 2-1 dari Udinese, pada 12 Februari 1961, di mana ia mengamati pemain bintang tim dan mentor Juan Alberto Schiaffino selama mantra pertamanya di klub. Dia menikmati periode yang paling sukses dengan Fiorentina, yang termasuk gelar liga pada tahun 1969
, klub kedua secara keseluruhan, sebelum kembali ke Roma pada tahun 1974. Dia memenangkan Coppa Italia dengan kedua klub, pada tahun 1964 dan 1966.