Dari pembentukannya awal pada Agustus 1861, resimen ini dikenal sebagai salah satu resimen paling disiplin di Indiana karena manuver infanteri, yang didasarkan pada taktik infanteri Prusia dan panggilan terompet, dan kesehatan umum yang baik dari orang-orangnya. Selama tahun 1861 dan 1862 pertunangan utama resimen termasuk Pertempuran Stasiun Rowlett, Pertempuran Shiloh, Pengepungan Korintus, dan Pertempuran Sungai Stones. Pada tahun 1863, Indiana ke-32 berpartisipasi dalam tiga kampanye besar: Kampanye Tullahoma, Kampanye Chickamauga, dan Kampanye Chattanooga. Pada tahun 1864 resimen bergabung dengan Kampanye Atlanta dan berperang dalam pertempuran di Resaca
Adairsville, Gereja New Hope, Dallas, Pickett's Mill, Marietta, Kennesaw Mountain, Peachtree Creek, Atlanta, Jonesborough, dan Stasiun Lovejoy. Indiana ke-32 menyelesaikan tugasnya di Texas, dan keluar pada tanggal 4 Desember 1865.