Elizabeth blev født på Greenwich Palace og blev opkaldt efter sine bedstemødre, Elizabeth af York og Elizabeth Howard. Hun var det andet barn af Henry VIII af England, der blev født i ægteskab for at overleve barndommen. Hendes mor var Henry's anden kone, Anne Boleyn. Ved fødslen var Elizabeth den formodede arving til Englands trone. Hendes ældre halvsøster, Mary, havde mistet sin position som en legitim arving, da Henry annullerede sit ægteskab med Marys mor, Catherine af Aragon, for at gifte sig med Anne, med den hensigt at frembringe en mandlig arving og sikre Tudor-tronen. Hun blev døbt den 10. september 1533; Ærkebiskop Thomas Cran, Marquess of Exeter, hertuginden af Norfolk og Dowager Marchioness of Dorset stod som hendes gudforældre.
Boleyn