De novo-syntesen af ceramid begynder med kondensation af palmitat og serin til 3-keto-dihydrosphingosin. Denne reaktion katalyseres af enzymet serin palmitoyltransferase og er det hastighedsbegrænsende trin i vejen. Til gengæld reduceres 3-keto-dihydrosphingosin til dihydrosphingosin, som derefter efterfølges af acylation af enzymet (dihydro) ceramide synthase til at producere dihydroceramid. Den endelige reaktion til at producere ceramid katalyseres af dihydroceramide desaturase. De novo-syntesen af ceramid finder sted i endoplasmic reticulum. Ceramid transporteres efterfølgende til Golgium ved enten at transportere ceramido eller ceramingolipidproteinet. Når der er tale om andre former for glykosid, kan der fremstilles dihydroceramide i Golgium.
(dihydro) keramid syntase