Efter borgerkrigens begyndelse blev Gamble udnævnt til oberstløjtnant i det 8. Illinois Kavaleriregiment den 18. september 1861. Hans udnævnelse blev opfordret af hans nære ven, den amerikanske kongresmedlem John F. Farnsworth, der rejste og kommanderede regimentet. Gambles søn George sluttede sig også til regimentet som første løjtnant. (George overlevede krigen, men blev dræbt i et sammenbrudt hotel under
1906 San Francisco jordskælv).