Ernestina A. López blev født i januar 1879 i Buenos Aires, Argentina, som datter af Cándido og Adriana W. López. Hun begyndte sin lærerkarriere og blev direktør for Sarmiento Model School. I 1890 grundlagde hun Liceo Nacional de Señoritas og tjente derefter som rektor. I 1901 opnåede hun den første doktorgrad udstedt til en kvinde i bogstaver og filosofi fra universitetet i Buenos Aires, og i 1902 sluttede hun sig til 31 andre kvinder, herunder Petrona Eyle, Cecilia Grierson,, hendes søster Elvira López, Anna Pintos og Elvira Rawson de Dellepiane for at danne den argentinske sammenslutning af universitetskvinder (AMUA), som et middel til at løse ansættelsesforstyrrelser mod kvinder og kvindelige universitetsstuderende. Gruppen arbejdede aktivt for at opnå juridiske, borgerlige og uddannelsesmæssige rettigheder for kvinder. I 1904 deltog López i verdensudstillingen i St. Louis
som Argentinas delegerede til Det Nationale Uddannelsesråd.