Thành phần môi trường để nuôi dưỡng tế bào EPC trong phương pháp nuôi cấy phân lập vi rút trên môi trường tế bào chẩn đoán bệnh xuất huyết mùa xuân của cá chép gồm những thành phần nào?
"6.4.1 Chuẩn bị tế bào một lớp
Chuẩn bị tế bào EPC (3.3.8) một lớp trên đĩa 24 giếng hay 96 giếng (4.3.1) hoặc chai nuôi tế bào 25 cm2 (4.3.2) ở 22 °C đến 25 °C khoảng 48 h trước khi thực hiện quá trình phân lập vi rút. Mật độ tế bào nuôi cấy với đĩa 24 giếng là khoảng 420.000 tế bào/ giếng (mỗi giếng chứa 1,5 ml môi trường nuôi cấy tế bào); với đĩa 96 giếng là 62.500 tế bào/ giếng (mỗi giếng chứa 150 µl môi trường nuôi cấy tế bào); chai 25 cm2 là 3.000.000 tế bào/chai (5ml môi trường nuôi cấy tế bào/chai). Thành phần môi trường tế bào (xem Phụ lục C). Sau 2 ngày, tế bảo phủ đều khoảng 80 đến 90% diện tích đáy chai hay giếng nuôi cấy tế bào, môi trường nuôi cấy tế bào trong, mầu đỏ cam là đạt yêu cầu." "C.1 Môi trường có thành phần cơ bản là môi trường L-15 Leibovitz:
- L-15 Leibovitz medium;
- 2mM Glutamine;
- 10% (v/v) foetal bovine serum, (FBS);
- 100IU penicillin/100µg streptomycin per ml hay 50µg/mL Gentamycin.
C.2 Môi trường có thành phần cơ bản là Minimum Essential Medium (MEM)
- MEM (Earles);
- 2mM Glutamine;
- 1% Non Essential Amino Acids (NEAA);
- 120 mg/L Sodium Pyruvate;
- 10% (v/v) foetal bovine serum (FBS);
- 100IU penicillin/100µg streptomycin per mL hay 50µg/mL Gentamycin."