Các loại thuốc thử dùng trong các phương pháp chẩn đoán bệnh sữa trên tôm hùm phải tiến hành điều chế như thế nào?
A.1 Dung dịch Giemsa đậm đặc
A.1.1 Thành phần
Giemsa (dạng bột) 1,0 g
Glyxerin 66 ml
Cồn metanol nguyên chất 66 ml
A.1.2 Chuẩn bị
Làm nóng glyxerin trong bể ủ nhiệt (4.2.2). Thêm thuốc nhuộm Giemsa trộn đều và ủ trong 2 h. Sau đó để nguội và thêm cồn metanol và giữ trong khoảng 2 tuần trước khi sử dụng.
Khi sử dụng pha loãng theo tỷ lệ 1 : 10 (thể tích) trong dung dịch đệm phosphat 0,01 M (pH = 7,0) và giữ trong 30 min.
A.2 Dung dịch đệm phosphat
A.2.1 Thành phần
Dung dịch natri hydrophosphat 9,47 g
Dung dịch kali dihydrophosphat 9,08 g
Nước cất 900 ml
A.2.2 Chuẩn bị
Hòa tan natri hydrophosphat, kali dihydrophosphat trong nước cất và lắc cho tan hết.
A.3 Dung dịch đệm TAE hoặc TBE
A.3.1 Thành phần
Dung dịch TAE (hoặc TBE) 10X 100 ml
Nước đã khử ion 900 ml
Tổng: 1000 ml dung dịch TAE (hoặc TBE) 1X
A.3.2 Chuẩn bị
Lấy 100 ml dung dịch TAE (TBE) 10X hoà chung với 900 ml nước khử ion, khuấy và lắc đều.
Bảo quản ở nhiệt độ phòng.
A.4 Thuốc nhuộm Hematoxylin (dung dịch Hematoxylin - Mayer)
A.4.1 Thành phần
Hematoxylin dạng tinh thể 1 g
Natri iodat 0,2 g
Amoni alum sulfat (hoặc kali alum sulfat) 50 g
Axit citric 1 g
Chloral hydrat 50 g
Nước cất 1 000 ml
A.4.2 Chuẩn bị
Hòa tan hematoxylin trong nước, sau đó cho natri iodat và amoni alum sulfat hoặc kali nhôm sulfat, hoà tan, tiếp tục cho axit citric và chloral hydrat rồi lọc qua giấy lọc.
Bảo quản dung dịch đã pha trong chai tối màu.
A.5 Thuốc nhuộm Eosin
A.5.1 Thành phần
Eosin Y 1 g
Etanol 70 % (thể tích) 1 lít
Axit axetic 5 ml
A.5.2 Chuẩn bị
Thêm từ 2 giọt đến 3 giọt axit axetic vào etanol 70 % (thể tích) (3.1.1). Hoà tan eosin trong cồn, sau đó thêm axit axetic rồi lọc qua giấy lọc.
Bảo quản dung dịch đã chuẩn bị trong chai tối màu.
A.6 Dung dịch Davidson
A.6.1 Thành phần
Etanol tuyệt đối (3.1.1) 330 ml
Formalin (dung dịch nước bão hòa khí formaldehyd, từ 36 % đến 38 %) 220 ml
Axit acetic 115 ml
Nước cất 355 ml
A.6.2 Chuẩn bị
Hòa tan axit acetic, formalin và etanol trong 355 ml nước cất, khuấy và lắc đều.
Bảo quản ở nhiệt độ phòng."