《Autophagy》:揭示YWHA/14-3-3蛋白通过非典型模式识别磷酸化的TFEB以控制TFEB的细胞质定位
作者首先对YWHA/14-3-3和TFEB两个蛋白进行二级结构预测以及结构域分析，结合已有的报道分析出 磷酸化的TFEB中S142和S211两个位点与调控TFEB的亚细胞定位有关(图1. A,B)。
图1. 磷酸化的TFEB中S211位点与YWHA/14-3-3 蛋白存在相互作用
图2. YWHA/14-3-3蛋白的两种亚型分别与TFEB-p-S211复合物的整体结构图
小肽TFEB-p-S211顶部主要是通过S209侧链以及E182与YWHAB形成氢键相互作用，中部通过R129、R58、Y130、K51以静电荷和氢键相互作用协同帮助YWHAB 与 TFEB-p-S211结合，小肽TFEB-p-S211下部作用界面主要以疏水相互作用构成(图3)。
图3. LECT2与Tie1直接结合
mode III结合模式是识别羧基端末尾的磷酸化小肽，N 端的精氨酸消失。
图4. LECT2中断Tie1 / Tie2异二聚化，Tie1对LECT2的功能行使发挥重要作用
实验表明静息态的细胞在营养充足的条件下，被mTORC1磷酸化的TFEB通过与衔接蛋白YWHA/14-3-3的相互作用被滞留在细胞质中;而在细胞处于饥饿或者溶酶体功能障碍的状态下，钙调 磷酸酶 (calcineurin)使TFEB去磷酸化，导致TFEB与YWHA/14-3-3分离并进入细胞核激活TFEB靶基因的转录。
反之经过 饥饿处理 后，S211位点被去磷酸化，TFEB 和 YWHA/14-3-3 蛋白分离 ，NLS 序列暴露出来，从而介导细胞核锚定和入核。
图5. YWHA/14-3-3蛋白和 TFEB 之间的作用关系调控 TFEB 亚细胞定位
1、 解析了YWHA/14-3-3蛋白的两种亚型分别与TFEB-p-S211复合物的结构;
2、 提出YWHA/14-3-3蛋白通过非典型模式识别TFEB-p-S211;